Flowcytometry là nghệ thuật có tác dụng đo được những đặc tính huỳnh quang với quang đãng họccủa một tế bào đối kháng hoặc những phân tử nlỗi vi sinc thiết bị, nhân với lan truyền dung nhan thể được chuẩnbị vào hỗn hợp lỏng lúc chúng đi qua một mối cung cấp sáng sủa. Các thiết bị flow cytometrythứ nhất là một máy đối kháng thông số (single-parameter) chỉ được thực hiện đểvạc hiện tại kích cỡ của tế bào. Lúc bấy giờ, những sản phẩm cùng với độ phức tạp cao cónăng lực vạc hiện nay bên cạnh đó 14 thông số kỹ thuật đang được cải tiến và phát triển. Nguyên ổn tắc cơ bảncủa chuyên môn này liên quan tới ánh sáng tán xạ cùng tia nắng huỳnh quang phát ra,được tạo ra do nguồn sáng sủa kích mê say (hay là chùm tia laze). Các thông sốchiếm được có thể là biết tin quý giá về những tinh tế hóa sinc, sinc lý cùng phântử của phân tử. Ánh sáng tán xạ vào chuyên môn tất cả tương quan thẳng cho tới các đặcđiểm cấu tạo cùng hình dáng học của tế bào, trong những khi đó, ánh sáng huỳnh quangtất cả nguồn gốc tự những đầu dò ghi lại huỳnh quang, tỉ trọng thuận cùng với lượng đầu dòhuỳnh quang quẻ tích hợp tế bào với những thành phần nằm trong tế bào. Có hai nhiều loại flowcytometry khác biệt là non-sorting (ko phân loại) cùng sorting (phân loại).

Bạn đang xem: Flow cytometry là gì

FASC (Flourescent activated cell sorters) là những vật dụng đếm tế bào theo loại chảycó chức năng phân loại những nạm bào được lưu lại huỳnh quang đãng xuất phát điểm từ 1 hỗn hợp cácquần thể tế bào.
Trước tiên, các phân tử sẽ được mang lại đèn tia laze trong mộtcái hóa học lỏng. Bất kỳ phân tử hòa hợp hoặc tế bào làm sao gồm size tự 0.2-150 µmphần nhiều phù hợp; những tế bào từ bỏ các mô rắn cần được loại trừ trước lúc phân tích.Lúc các phân tử trải qua tia laze, bọn chúng tán xạ tia nắng Laser, ánh nắng tán xạ với ánhsáng sủa huỳnh quang sẽ tiến hành thu trên thấu kính tại vị trí tương thích. Sự kết hợp giữabộ phận bóc chùm tia và các kính thanh lọc vẫn phía tia nắng tán xạ cùng ánh nắng huỳnhquang tới detector; ở đầu cuối những detector sẽ tạo ra biểu lộ điện tỉ lệ thành phần thuậncùng với biểu lộ quang học.
Cácyếu tắc chủ yếu của sản phẩm flow cytometer (đếm tế bào theo cái chảy) với cellsorter (phân một số loại tế bào) bao gồm: hệ hỗn hợp, khối hệ thống quang học (ánh sángkích phù hợp cùng cỗ thu ánh nắng kích thích), màng lưới điện (detector) với một máytính. Hệ thống dung dịch bao gồm trách nát nhiệm điều hướng loại dung dịch cất những hạttới mối cung cấp sáng. Hệ thống quang đãng học tập kích ưng ý đang tập trung nguồn sáng tới những tếbào/ những phân tử, còn hệ thống quang học tập thu thừa nhận đã gửi các ánh sáng tán xạ hoặcánh sáng huỳnh quang cho tới mạng lưới điện tử. Mạng lưới năng lượng điện sẽ thấy tín hiệuvới chuyển các dấu hiệu thành những thông tin số tỉ lệ thuận cùng với độ mạnh ánh sángcùng laptop sẽ so với các thông báo này.
Kỹthuật flow cytometry được thực hiện thoáng rộng trong tương đối nhiều ứng dụng nhằm phạt hiệncác kháng nguim màng, tế bào hóa học với nhân. Bên cạnh đó, tổng thể tế bào cùng những thànhphần tế bào nhỏng bào quan lại, nhân, DNA, RNA, truyền nhiễm dung nhan thể, cytokines, hormone vàprotein hoàn toàn có thể được phạt hiện nay thông qua kỹ thuật này. Việc so với các quátrình vào tế bào cùng chu trình tế bào nhờ vào Việc đo lượng calcium và năng lượng điện thếmàng cũng là 1 trong các vận dụng của flow cytometry. Bài viết tiếp sau đây sẽtrình diễn kỹ hơn về những yếu tắc của một sản phẩm flow cytometry.
Hệthống hỗn hợp gồm mục đích di chuyển các tế bào trong một hỗn hợp đi qua thiếtbị để chiếm được những dữ liệu, hệ thống này bao hàm 2 thành phần: sheath fluid (dònghỗn hợp bảo vệ/ cái hỗn hợp mặt ngoài) với pressurized line (dòng áp suất).Sheath fluid là một dung dịch trộn loãng (thường thì là đệm PBS- phosphate-bufferedsaline), được tiêm vào buồng flow nằm tại vị trí trung trung khu của thiết bị bởi chiếc áp suất.Một áp suất bầu không khí cũng khá được tiêm vào những tế bào đã làm được tổ hợp trong ống mẫuvào phía bên trong phòng flow. Dòng mẫu sẽ tiến hành chuyển vào lõi trung trọng điểm mà lại xung quangthuộc dòng dung dịch đảm bảo và đổi thay mẫu lõi (core fluid- một loại vô cùng khiêm tốn chỉnhằm từng tế bào hoặc từng phân tử đi qua), được tạo thành dựa vào sự biệt lập áp suấtgiữa loại hỗn hợp bên phía ngoài (sheath fluid) và loại mẫu (sample fluid), tự đógóp triệu tập tế bào/phân tử gồm vào mẫu mã thành dòng tế bào 1-1 để trải qua chùm tiaLaser. Do kia, quá trình này cho phép chiếu sáng đồng đông đảo từng tế bào bắt buộc được gọilà quy trình tập trung tdiệt đụng lực học (hydrodynamic focusing).

Xem thêm: Grant Cardone Là Ai - Grant Cardone Đã Từng Ghét Bán Hàng Như Thế Nào


*

Tỷlệ chuyển các tế bào vào chùm tia tia laze có thể được triển khai dựa vào hệ thống thiết bị flowcytometer
dựa trên mục tiêu của đối chiếu. lấy ví dụ như, tỉ trọng loại chảy cao thường sửdụng mang lại vấn đề đo lường nlỗi immunophenotyping sống tế bào động vật có vú, trong khikia, tỉ trọng cái tung phải chăng hay thích phù hợp với những vận dụng thử dùng độ phân giảicao nhỏng đối chiếu nguyên tố DNA. Các thông số quan trọng cần thiết thu được nhờsự xúc tiếp các phân tử cùng với chùm tia Laser dựa vào vào vận động buổi tối ưu của các hệthống dung dịch. Do đó, cần phải đảm bảo an toàn rằng không có bong bóng khí cùng những mảnhvụn vào hệ thống này nhằm áp lực sẽ đồng những sống số đông thời hạn.
Hệthống quang đãng học vào thiết bị flow cytometry làm cho nhiệm vụ chiếu ánh nắng kích thíchbao hàm đèn laze, thấu kính với phần tử thu ánh nắng. Thấu kính có vai trò địnhhình cùng triệu tập chùm tia Laser. Ánh sáng Laser được tạo ra bằng phương pháp kích thíchnhững điện tử (electron) sẽ ở trạng thái cơ bản lên trạng thái kích say mê gồm mứcnăng lượng cao nhờ điện áp, sau một thời gian ngắn thêm (hay là 10-7 –10-8 giây), những điện tử sẽ trở về trạng thái cơ phiên bản và vạc ra nănglượng dưới dạng các photon tia nắng. Sau khi laze chiếu vào tế bào, hồ hết ánhsáng sủa bị chệch hướng so với mặt đường tryền trực tiếp vày gặp gỡ phải đồ gia dụng cản trở được Gọi làánh nắng tán xạ. Có nhị các loại ánh nắng tán xạ là forward scatter (FSC) cùng sidescatter (SSC). Các yếu tố tác động đến việc tán xạ tia nắng là màng tế bào,nhân, các phân tử của tế bào, hình dáng với bề mặt tế bào. Nhìn chung kích cỡ củatế bào hoặc của một phân tử với độ phức tạp bên trong tế bào được sệt hiệu vì loạitán xạ. Ánh sáng FSC là công dụng của sự việc nhiễu xạ chiếm được dọc theo trục của chùmtia tới tia laze. FSC tỉ lệ thành phần với diện tích S bề mặt hoặc size tế bào với phù hợpnhằm phân phát hiện, phân biệt các phân tử về form size, hay thực hiện thông dụng trongimmuophenotyping. Còn ánh sáng SSC bao gồm phần lớn những ánh sáng khúc xạ cùng nhiễuxạ, được thu ở góc cạnh 90o đối với chùm tia cho tới tia laze. SSC tỉ trọng với thànhphần các phân tử hoặc độ tinh vi bên phía trong tế bào. Dường như, tia nắng huỳnhquang quẻ có xuất phát từ phòng thể hoặc dye khắc ghi huỳnh quang đãng như thể PI cũng đượcsự phản xạ trên cùng một góc với SSC.
*

Hình 2: Ánh sáng tán xạ (lightscattering). FSC tỉ lệ với kích cỡ, trong những khi đó SSC tỉ lệ cùng với những thành phầnvới độ tinh vi bên phía trong tế bào.
Cókhông hề ít thông số kỹ thuật laze trong sản phẩm công nghệ flow cytometer dựa vào các loại chất huỳnh quangđược kích đam mê. Đèn argon laze (một đèn tia laze thông thường với bước sóng kíchmê thích 488 nm) được áp dụng để kích ưa thích các dye tổng thích hợp nhỏng fluoresceinisothiocyanate (FITC) cùng dye huỳnh quang đãng thoải mái và tự nhiên như tảo cùng phytoplankton. Rấtnhững máy flow cytometer cùng sorter có thêm đèn tia laze có công dụng kích ưng ý chấthuỳnh quang nghỉ ngơi bước sóng kích phù hợp sinh sống dải sóng UV (300-400nm) hoặc red diodekích ưa thích chất huỳnh quang đãng làm việc dải sóng đỏ (630 nm).

Xem thêm: " What Is Up Nghĩa Là Gì ? Cách Diễn Đạt What'S Up


Hệthống thu nhấn ánh nắng có thấu kính để thu ánh sáng phát ra trường đoản cú sự tương tácgiữa chùm tia laze và hạt; một khối hệ thống gương với kính lọc nhằm bóc cùng tiếp đến hướngtia nắng có bước sóng sệt hiệu mang lại detector phù hợp.

Chuyên mục: Ý NGHĨA
Bài viết liên quan

Trả lời

Email của bạn sẽ không được hiển thị công khai. Các trường bắt buộc được đánh dấu *